RMC可視化超薄切片機切片前的樣本制備
樣本質量直接決定切片成敗。PowerTome PCZ對樣本的基本要求是:包埋塊硬度均勻、切面平整、無雜質。正確操作是發揮設備性能的關鍵。以下為PowerTome PCZ標準操作流程及注意事項:
松開樣品夾旋鈕,將包埋塊或冷凍樣品放入卡槽,確保底面與樣品臺貼合;
調節三維微調旋鈕,使樣品切割面與刀刃平行(可通過觀察窗初步確認);
觸控屏進入“參數設置"界面,輸入目標厚度(如50nm);
根據樣品硬度調節切片速度(樹脂建議2mm/s,冰凍組織建議1mm/s);
點擊“開始"按鈕,觀察切片過程,若出現卷邊或斷裂,立即暫停調整;
規范操作可將設備故障率降低60%,延長核心部件壽命。生物樣本:以小鼠肝臟為例,流程包括:①固定(4%戊二醛4℃過夜,1%鋨酸后固定2h)→②脫水(梯度乙醇:50%→70%→90%→100%,每步1h)→③滲透(1:1乙醇/環氧樹脂→純樹脂,過夜)→④包埋(60℃聚合48h)。包埋后需用專用修塊機將樣本修成梯形(底面約1mm×1mm,高度2-3mm),確保切面暴露在中心。若修塊不平整,切片時易出現“tiao刀"(切片無法連續)。材料樣本:以聚合物薄膜為例,需用冷鑲嵌樹脂(如LR White)包埋,避免熱鑲嵌導致樣本變形。包埋后樣本需在室溫下全固化(24h),再安裝到PCZ樣本頭。對于硬脆材料(如陶瓷碎片),需先用環氧樹脂浸潤,填補內部孔隙,防止切片時碎裂。關鍵提示: 樣本修塊后需用鋒利單刃刀片預切,去除表層硬化層,確保切面新鮮——這一步常被新手忽略,卻是減少切片褶皺的重要措施。RMC可視化超薄切片機切片前的樣本制備