RMC可視化超薄切片的材料微觀結(jié)構(gòu)分析應(yīng)用
操作PowerTome PCZ需遵循嚴(yán)格流程,同時(shí)結(jié)合經(jīng)驗(yàn)優(yōu)化參數(shù)。
開(kāi)機(jī)預(yù)熱:?jiǎn)?dòng)設(shè)備,待溫控系統(tǒng)穩(wěn)定(約15min),避免溫度漂移影響切片。
安裝樣本:將修塊后的樣本頭裝入樣本臂,通過(guò)側(cè)方旋鈕固定,確保無(wú)松動(dòng)。
安裝刀片:選擇適配刀型,調(diào)節(jié)刀臺(tái)前后/左右位置,使刀刃與樣本面間距約50μm(可通過(guò)低倍顯微鏡觀察)。
對(duì)刀:緩慢下降樣本臂,直至樣本面與刀口接觸(觀察到輕微阻力或切片開(kāi)始脫落),記錄此時(shí)樣本臂位置。
參數(shù)設(shè)置:根據(jù)樣本選擇模式(如生物組織用熱膨脹,硬度>3GPa用機(jī)械模式),設(shè)定厚度(初始建議100nm)、速度(5-10μm/s)。
切片收集:?jiǎn)?dòng)循環(huán),切片漂浮至水槽后,用睫毛筆引導(dǎo)成帶,選擇銀灰色(約70nm)或淡金色(約90nm)切片撈取。
若切片出現(xiàn)“顫痕"(周期性厚度波動(dòng)),可檢查環(huán)境振動(dòng)(如關(guān)閉空調(diào)),或在刀臺(tái)下墊硅膠減震墊。
切割軟樣本(如脂肪組織)時(shí),可在水槽中添加0.1%溶液,減少切片膨脹。
連續(xù)切片30片后,暫停5min讓設(shè)備散熱,避免電機(jī)過(guò)熱導(dǎo)致進(jìn)給偏差。- 超薄切片是透射電鏡(TEM)觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵步驟。PowerTome PCZ憑借其靈活性與穩(wěn)定性,在生命科學(xué)研究中廣泛應(yīng)用于以下場(chǎng)景:某高校電鏡中心的使用數(shù)據(jù)顯示,引入PCZ后,TEM樣品制備周期從3天縮短至1.5天,廢片率從25%降至8%。其可視化界面尤其受學(xué)生歡迎,操作培訓(xùn)時(shí)間從1周減少至2天。
模式生物組織觀察:如小鼠肝臟、斑馬魚(yú)胚胎。PCZ支持小尺寸樣品(直徑5mm),配合30nm切片厚度,可清晰顯示線粒體嵴、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器結(jié)構(gòu)。其三維微調(diào)功能降低了組織偏移導(dǎo)致的廢片率,實(shí)驗(yàn)人員反饋“單塊肝臟組織平均出片量提升30%"。
神經(jīng)科學(xué)研究:對(duì)大鼠腦切片進(jìn)行連續(xù)超薄切片,PCZ的恒速推進(jìn)模式避免了樣品拉伸,確保神經(jīng)元突觸結(jié)構(gòu)的完整性。結(jié)合冷凍切片附件,可直接對(duì)新鮮腦組織切片,保留膜蛋白活性,便于后續(xù)免疫金標(biāo)記實(shí)驗(yàn)。
植物學(xué)研究:植物細(xì)胞壁較厚(如木質(zhì)部細(xì)胞可達(dá)5μm),PCZ的高硬度樣品適配能力(最大30HRC)可穩(wěn)定切割,配合50nm切片厚度,能清晰顯示細(xì)胞間隙與胞間連絲。
RMC可視化超薄切片的材料微觀結(jié)構(gòu)分析應(yīng)用